Изобретение относится к области медицины, в частности к онкологической фармакологии. Сущность изобретения заключается в том, что разработан новый препарат на основе нативного сквалена, полученного из жира глубоководной акулы или оливкового масла. Нативный сквален активируют с получением активных производных, обладающих противоопухолевым действием. Активацию проводят с помощью нагревания, УФ- или ИК-облучения воздействием активной формы кислорода. Техническим результатом данного изобретения является создание нового противоопухолевого препарата на основе активированного сквалена, не оказывающего цитостатического действия на здоровые клетки.

Заболеваемость злокачественными опухолями за последние годы возросла в России более чем на 10%. Ежегодно регистрируются около 500 тыс. вновь заболевших. По уровню смертности онкологические заболевания уступают только сердечно-сосудистой патологии. 

Технической задачей данного изобретения является увеличение длительности ремиссии, снижение побочных осложнений и расширение ассортимента противоопухолевых средств.

Фармакотерапия опухолевой патологии, наряду с лучевой терапией и хирургией, является наиболее важной составляющей борьбы с онкологическими заболеваниями.

Технической задачей настоящего изобретения является создание противоопухолевого препарата на основе природного, физиологически приемлемого агента, способного при доступной обработке, служить достаточно эффективным средством при различных формах опухолей. 

Основой для создания такого вещества послужил жир глубоководных акул, известный с древних времен.

Рыбаки древней Японии назвали его “Same dawa” или “панацея”. У акул, которых они ловили на дне залива, глубиной 1000 метров, было восхитительное мясо. Они особенно ценили их жир, который употребляли регулярно для улучшения самочувствия. В 1758 году знаменитый ботаник и зоолог Карл Линней объявил о большой ценности для здоровья и о медицинском значении экстракта жира глубоководной акулы. На средиземноморских островах “чудо-масло” столетиями было средством от различных болезней, а также как источник силы и энергии. В скандинавских странах традиционно использовался жир акулы рыбаками для заживления ран, лечения респираторных заболеваний и воспалений прямой кишки. В Китае экстракт жира глубоководной акулы был описан в древней фармацевтической книге “Хонэукомуко”. В Испании древние моряки регулярно принимали “асе ite de bacalao” или “жир великой рыбы” в целях сопротивляемости простудам и другим болезням.

В 1906 году доктор Митпумаро Тцуйимото сделал глубокое исследование жира акулы и открыл, что в этом жире содержится очень большое количество ненасыщенных углеводородов. Позже он назвал их “Squalene” – сквален.

В качестве антираковых агентов в последнее время разработаны такие производные сквалена, как скваламины в составе с другими противоопухолевыми агентами, включая лучевую терапию.

Природный сквален, содержащийся в жире печени акулы и растительных маслах (например, оливковом, соевом и др. ), требует специальной обработки (активации), для того чтобы достичь желаемого эффекта: излечения от опухоли и сведения к минимуму побочных явлений, с которыми обычно сталкиваются при лечении опухолей и особенно лейкозов, сарком и метастатических форм.

Поставленная задача решается тем, что создан противоопухолевый препарат на основе природного сквалена, при этом его активируют для приобретения полезных свойств термообработкой или воздействием ультрафиолетового (УФ) излучения, инфракрасного (ИК) излучения или воздействием активной формой кислорода.

В результате активации получают активированный сквален (АС), представляющий собой маслянистую жидкость

В результате проведения вышеописанных манипуляций получен новый препарат АС, обладающий высокой противоопухолевой активностью. Главным достоинством нового препарата является его избирательная цитотоксичность в отношении неопластических (опухолевых) клеток.

 

Клинические испытания препаратов.

Лечение острых лейкозов.

Под наблюдением находилось 40 больных с различными формами лейкоза. Возраст больных от 16 до 22 лет. Срок наблюдения за больными 1 год.

Лечение проводили в стационарных условиях (3 месяца). Суточные дозы препарата 0,5 мл на 1 кг веса. Введение per os. Кратность приема – 4-5 раз в день. Увеличение дозы препарата сопровождалось нарушением всасывания, диареей и тем самым снижением клинического эффекта.

Диагноз поставлен на основании клинической картины и лабораторных данных (анализ крови пунктатов костного мозга). В качестве контроля раз в 2 недели исследовали содержание бластов в пунктах костного мозга и полный анализ крови.

Одновременно проводили изучение биохимических показателей крови для контроля за функциями внутренних органов (печени, почек, тканей мышц).

Клинические и параклинические наблюдения показали, что наиболее эффективно поддаются лечению лимфобластный и плазмобластный лейкозы. Симптомы интоксикации были устранены в течение 2-х недель, хотя количество бластов за этот период в пунктатах костного мозга оставались неизменными. Однако в периферической крови отметили увеличение количества эритроцитов, тромбоцитов, активности трансаминазы, креатинфосфокиназы до физиологических значений.

В дальнейшем выявили снижение количества бластов в пунктатах костного мозга больных острым лейкозом.

Как видно из представленных данных, в процессе лечения число бластов снижается более медленно, чем при лечении препаратами химиотерапии. Однако АС не имеет побочных реакций и осложнений. Состав красной и белой крови полностью нормализуется у больных к концу 1 месяца лечения и в течение всего периода наблюдения (1 год) достоверно не меняется.

Клинические симптомы заболевания устранялись в первые недели лечения и не беспокоили больного в течение всего срока наблюдения.

Таким образом, АС в дозах 0,5 мг/кг веса не менее эффективно устранял симптомы заболевания и не оказывал токсического воздействия на организм больного. Никаких признаков поражения нервной системы, печени, почек, а также подавления роста красной крови и тромбоцитов, характерных для комплекса гормональных и химиотерапевтических препаратов, на фоне стечения АС не наблюдали. Напротив, в процессе лечения отметили восстановление нарушенных ранее физиологических параметров.

При других формах лейкоза терапевтический эффект проявлялся в том же объеме, но в более растянутых временных интервалах. Первые клинические и параклинические признаки ремиссии заболевания фиксированы к концу 1-го месяца от начала лечения. Нормализация показателей красной и белой крови, а также биохимических параметров наступала в 40-70 дневном интервале, тогда как устранение бластов (пунктаты костного мозга) фиксировали только после 100-120 дневного лечения. Как и при других формах осложнений и побочных реакций не зафиксировано.

Изобретение иллюстрируется примерами на конкретных пациентах, имеющих другие формы рака.

Пример 1.

Больной М., 53 лет, поступил в хирургический стационар 15 мая 2000 года в удовлетворительном состоянии с жалобами на периодически возникающие боли в области заднего прохода с иррадиацией в крестцовую и поясничную области. Считает себя больным в течение последних 4-х месяцев, когда без видимой причины возникло кровотечение после дефекации в объеме 10-15 мл, затем появился болевой синдром. Явлений кишечной непроходимости не отмечалось.

При осмотре явлений опухолевой кахексии и интоксикации нет. По данным общего анализа крови – умеренная анемия 95 г/л.

При ректороманоскопии выявлена опухоль ампулярного отдела прямой кишки на 2/3 диаметра.

Клинический диагноз: рак прямой кишки T2N1M0. Низкодифференцированная аденокарцинома с элементами плоскоклеточного рака без ороговения.

В течение 56 дней пациенту проводилось лечение препаратом АС (сквален, облученный УФ в течение 3-х часов; суточные дозы 20 мл или 4 мл 5 раз в день).

На протяжении курса лечения кровотечение не рецидивировало, болевой синдром полностью купирован. Явления кишечной непроходимости не нарастали.

С целью контроля противоопухолевой активности препарата пациенту каждые две недели выполняли ректоскопию и биопсию опухоли с последующим морфологическим исследованием на предмет степени цитолиза раковых клеток.

Биопсия опухоли: 14, 28, 42, 56 день.

Результаты биопсии:

14 день – цитолиз более 50% опухолевых клеток;

28 день – цитолиз более 70% опухолевых клеток;

42 день – цитолиз более 90% опухолевых клеток;

56 день – единичные опухолевые клетки.

Опухолевая ткань постепенно замещается грануляционной тканью с очагами ангиоматоза и обилием миофибробластов и лимфоцитов, среди полей которой гистологически наблюдаются остатки тубулярной аденокарциномы, задавленной грануляционной тканью. Видоизмененная ткань со следами опухолевых клеток требует удаления.

Больному выполнена операция: брюшно-промежностная экстирпация прямой кишки. Расширенная лимфаденэктомия.

Пациент выписан на 10 сутки после операции в удовлетворительном состоянии.

Пример 2

Больной Н., 64 лет, поступил в хирургический стационар 15 мая 2000 года с жалобами на слабо выраженные, постоянные боли в левой половине живота больше внизу, явления копростаза, хронического запора.

Считает себя больным в течение последних 8 месяцев, когда после очистительной клизмы по поводу хронического запора появилась кровь в кале в объеме примерно до 30-50 мл. После этого кровотечение не повторялось. Однако через 2 недели появились постоянные ноющие боли в левой половине живота с иррадиацией в поясничную область.

Поступил в стационар для обследования и лечения.

При исследовании выявлена опухоль ректо-сигмовидного отдела толстой кишки со смешанным типом роста с прорастанием в забрюшинную клетчатку и зону подвздошных сосудов слева, выявлены метастазы в нижнюю долю левого легкого.

У больного при обследовании выявлена выраженная легочно-сердечная недостаточность, в анамнезе – инфаркт миокарда 1998, 1999 гг., стенокардия напряжения 2 функциональный класс, недостаточность кровообращения 2 степени. В легких – эмфизема, хронический бронхит.

Учитывая данную клиническую картину и состояние больного, решено проводить симптоматическую терапию, показано оперативное вмешательство только при нарастании симптомов кишечной непроходимости.

Анализ биопсийного материала позволил поставить диагноз. Диагноз: рак ректосигмоидного отдела толстой кишки T2N1M1. Рак сложного строения с преобладанием элементов умеренно- и малодифференцированной аденокарциномы и железисто-плоскоклеточного рака.

С первого дня госпитализации, наряду с традиционным лечением, пациент получал препарат АС, полученный термообработкой. По окончании 2-ой недели лечения у пациента изменился характер болей: стали менее интенсивными, отсутствует иррадиация в поясничную область. Стул стал регулярным 2-3 раза в неделю, кровотечений не было.

Биопсию проводили 1 раз в месяц. Гистологическое исследование показало, что дегенеративные изменения представлены в виде ослизнения опухолевой ткани, некроза и кальцификации ее.

В конце лечения констатировали гибель 90% опухолевых клеток.

С целью предотвращения явлений кишечной непроходимости через 4,5 месяца пациенту выполнена паллиативная операция – частичная резекция опухоли с выведением колостомы на переднюю брюшную стенку. Обнаружены метастазы и проведен анализ (гистология). В микропрепарате пациента выявлен цитолиз более 35% опухолевых клеток, единичные очаги кровоизлияний, некробиоза и некроза опухолевой ткани не выявлено.

Через 7 дней пациент выписан по месту жительства для амбулаторного лечения. Лечение активированным скваленом прекращено. Курс лечения 150 дней. Осмотр через два месяца показало, что состояние больного стабильное. Болевой синдром отсутствует.

Пример 3

Пациент Б., 58 лет, поступил в хирургический стационар с жалобами на умеренные боли в области заднего прохода, периодически возникающие кровотечения после дефекации, отмечает похудание и общее недомогание.

Считает себя больным в течение последних 6 месяцев, когда впервые появились чувство дискомфорта в области ануса, кровотечение после дефекации. При амбулаторном обследовании – колоноскопии – выявлена опухоль на границе сигмовидной и прямой кишки, имеющая экзофитный рост. Признаков кишечной непроходимости не выявлено.

Поступил для дальнейшего лечения в стационар. При поступлении состояние удовлетворительное, явлений интоксикации не отмечено. Болевой синдром в первые дни пребывания в стационаре купировался парентеральным введением наркотических анальгетиков – до 5-6 раз в сутки.

Клинический диагноз: рак прямой кишки T2N0M0. Высокодифференцированная аденокарцинома с элементами перстневидноклеточного рака.

В течение 130 дней пациенту проводилось лечение препаратом АС (сквален, активированный термообработкой). Суточная доза – 30 мл, прием 5 раз в день по 6 мл.

На протяжении всего курса лечения явления кишечной непроходимости не проявлялись, кровотечение после дефекации не возобновлялось, болевой синдром значительно уменьшился (до 1 инъекции ненаркотических анальгетиков).

С целью контроля противоопухолевой активности препарата пациенту каждые две недели выполняли ректоскопию и биопсию опухоли с последующим морфологическим исследованием на предмет степени цитолиза раковых клеток.

Биопсия – 14, 28, 42, 56, 84 день и интраоперационная морфология (130 день).

Результаты биопсии:

14 день – цитолиз более 50% раковых клеток;

28 день – более 70%;

42 день – более 90%;

56 день – более 90%;

84 день – более 90%;

130 день – более 90%.

После проведенного лечения выполнена операция: брюшно-промежностная экстирпация прямой кишки. Расширенная лимфаденэктомия.

Послеоперационный период протекал без особенностей. Пациент подготовлен к выписке.

Через год после начала лечения пациент был обследован повторно: 1) боли не беспокоят больного; 2) кровотечение не зарегистрировано; 3) явлений непроходимости нет; 4) признаков рецидивирования опухоли нет.

 

Таким образом, активированный сквален (независимо от метода обработки) зарекомендовал себя как эффективный противоопухолевый препарат, не имея при этом ни побочных реакций, ни осложнений во время длительного приема.